Национальный стандарт РФ ГОСТ Р 54085-2010 "Продукты пищевые. Метод выявления бактерий рода Shigella" (утв. приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 ноября 2010 г. N 745-ст) стр. 7

А.8 Агар трехсахарный железистый (TSI агар), или агар Клиглера, или агар Олькеницкого

А.8.1 Состав TSI агара

Экстракт мясной, г
3,0
Экстракт дрожжевой, г
3,0
Пептон, г
20,0
Натрий хлористый, г
5,0
Лактоза, г
10,0
Сахароза, г
10,0
Глюкоза, г
1,0
Железа III цитрат, г
0,3
Натрия тиосульфат, г
0,3
Феноловый красный, г (или 6 раствора, приготовленного по А.3.1.2, если среду готовят из отдельных компонентов)
0,024
Агар, г (зависит от желирующих свойств)
9,0-18,0
Вода,
1000
При нагревании растворяют дегидратированные компоненты или дегидратированную основу среды в воде. Устанавливают рН так, чтобы после стерилизации он составлял (7,4 + 0,2) при температуре 25°С. Переносят по 7-8 среды в пробирки. Стерилизуют в автоклаве при температуре (121 1)°С в течение 15 мин. После стерилизации оставляют в наклонном положении так, чтобы получился столбик среды высотой, равной приблизительно двум диаметрам пробирки (2-2,5 см), а над ним - скошенная поверхность длиной около 5 см.
Допускается использование агара Клиглера или среды Олькеницкого. Среды готовят в соответствии с рекомендациями, указанными на этикетке.

А.9 Агар с мочевиной (агар Кристенсена)

А.9.1 Основа среды

А.9.1.1 Состав
Пептон, г
1,0
Глюкоза, г
1,0
Натрий хлористый, г
5,0
Калий фосфорнокислый однозамещенный, г
2,0
Феноловый красный, г (или 3 раствора, приготовленного по А.3.1.2, если среду готовят из отдельных компонентов)
0,012
Агар, г (зависит от желирующих свойств)
9,0-18,0
Вода,
1000
А.9.1.2 Приготовление
При нагревании растворяют дегидратированные компоненты или дегидратированную основу в воде. Устанавливают рН так, чтобы после стерилизации он составлял (6,8 0,2) при температуре 25°С. Основу среды равномерно разливают в колбы или флаконы и стерилизуют в автоклаве при температуре (121 1)°С в течение 15 мин.

А.9.2 Раствор мочевины

А.9.2.1 Состав
Мочевина, г
40,0
Вода, , не более
100
А.9.2.2 Приготовление
Мочевину помещают в колбу вместимостью 100 , растворяют в воде, объем раствора доводят водой до метки. Раствор мочевины стерилизуют методом мембранной фильтрации по ГОСТ 26670 через фильтры с размером диаметра пор 0,22 мкм, или текучим паром в течение 30 мин.

А.9.3 Раствор фенолового красного

А.9.3.1 Состав и приготовление - по А.3.1.2

А.9.4 Среда готовая

А.9.4.1 Состав
Основа (А.9.1),
950
Раствор мочевины (А.9.2),
50
А.9.4.2 Приготовление
Прибавляют с соблюдением правил асептики раствор мочевины к основе, предварительно расплавленной и охлажденной до температуры 44-47°С. Разливают готовую среду в стерильные пробирки по 7-8 . После этого среду скашивают так, чтобы получились скошенная поверхность и столбик среды высотой, равной приблизительно двум диаметрам пробирки - 2-2,5 см (А.9.2).

А.10 Среда для определения L-лизин декарбоксилазы

А.10.1 Состав

L-лизин моногидрохлорид, г
5,0
Экстракт дрожжевой, г
3,0
Глюкоза, г
1,0
Бромкрезоловый пурпуровый, г (или 5 раствора, приготовленного по А.10.3)
0,015
Вода,
1000

А.10.2 Приготовление

При нагревании растворяют дегидратированные компоненты или дегидратированную основу в воде. Устанавливают рН так, чтобы после стерилизации он составлял (6,8 0,2) при температуре 25°С. Разливают среду по 2-5 в стерильные пробирки. Стерилизуют в автоклаве при температуре (121 1)°С в течение 15 мин.

А.10.3 Раствор бромкрезолового пурпурного

А.10.3.1 Состав
Бромкрезоловый пурпурный, г
0,3
Вода,
100
А.10.3.2 Приготовление
Бромкрезоловый пурпурный переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в воде. Раствор переливают в мерную колбу вместимостью 100 и доводят водой до метки.
Раствор хранят в закрытом сосуде из темного стекла при комнатной температуре не более 3 мес.

А.11 Среда для Фогес-Проскауера (VP) реакции

А.11.1 Состав

Пептон, г
7,0
Глюкоза, г
5,0
Калий двузамещенный фосфорнокислый, г
5,0
Вода,
1000

А.11.2 Приготовление

При нагревании растворяют дегидратированные компоненты или дегидратированную основу в воде. Устанавливают рН так, чтобы после стерилизации он составлял (6,9 0,2) при температуре 25°С. По 3 среды разливают в пробирки. Стерилизуют в автоклаве при температуре (121 1)°С в течение 15 мин.

А.12 Реактив для Фогес-Проскауера (VP) реакции

А.12.1 Раствор креатина (N-амидиносаркозин)

А.12.1.1 Состав
Креатина моногидрат, г
0,5
Вода,
100
А.12.1.2 Приготовление
Растворяют креатина моногидрат в воде.

А.12.2 1-нафтол, спиртовой раствор

А.12.2.1 Состав
1-нафтол, г
6
Этиловый спирт 96%-ный (по объему),
100
А.12.2.2 Приготовление
Растворяют 1-нафтол в 96%-ном этиловом спирте.